జర్నల్ ఆఫ్ వెటర్నరీ సైన్స్ & మెడికల్ డయాగ్నోసిస్

వైరల్ ఇన్ఫెక్షన్ల నిర్ధారణలో రీకాంబినెంట్ హిస్టిడిన్-ట్యాగ్డ్ యాంటిజెన్స్ అప్లికేషన్

మహ్మద్ M హోస్సేన్ మరియు రేమండ్ R రోలాండ్

హిస్టిడిన్-ట్యాగ్ చేయబడిన ప్రోటీన్లు తరచుగా యాంటీబాడీస్‌తో గుర్తించబడతాయి. ఇవి రోగనిరోధక అధ్యయనాలలో ఉపయోగపడతాయి. ఫ్లోరోసెంట్ మైక్రోస్పియర్ ఇమ్యునోఅస్సే (FMIA)లో సెట్ చేయబడిన ప్రతి మైక్రోస్పియర్ పూసకు జోడించబడిన రీకాంబినెంట్ ప్రోటీన్ యొక్క సాపేక్ష మొత్తాన్ని అంచనా వేయడానికి పెంటా-హిస్ మోనోక్లోనల్ యాంటీబాడీ (mAb) ఉపయోగించబడింది. ఈ అధ్యయనంలో, ఏడు విభిన్న జంతు వైరస్‌ల నుండి రీకాంబినెంట్ యాంటిజెన్‌లను గుర్తించడానికి యాంటీ-హిస్ mAb యొక్క ఉపయోగం: పోర్సిన్ రిప్రొడక్టివ్ మరియు రెస్పిరేటరీ సిండ్రోమెవైరస్ (PRRSV), పోర్సిన్ సర్కోవైరస్ టైప్ 2 (PCV2), స్వైన్ ఇన్‌ఫ్లుఎంజావైరస్ (SIV), ఆఫ్రికన్ వైరస్ (SIV), ASFV), క్లాసికల్ స్వైన్ ఫీవర్‌వైరస్ (CSFV), బోవిన్ వైరల్ డయేరియా వైరస్ (BVDV), మరియు రిఫ్ట్ వ్యాలీఫీవర్ వైరస్ (RVFV) కలపడం వృధా అయిన తర్వాత మైక్రోస్పియర్ పూసలకు కట్టుబడి ఉంటుంది. ప్రోటీన్లు 6xHis-ubiquitin ఫ్యూజన్ ప్రోటీన్‌గా ఉత్పత్తి చేయబడ్డాయి మరియు లుమినెక్స్ మాగ్‌ప్లెక్స్ ® పాలీస్టైరిన్, కార్బాక్సిలేటెడ్ మైక్రోస్పియర్ పూసలతో సమయోజనీయంగా జతచేయబడ్డాయి. లక్ష్య యాంటిజెన్‌లు సింగిల్ మల్టీప్లెక్స్‌లో అసెంబుల్ చేయబడ్డాయి మరియు యాంటీ హిస్-ట్యాగ్ mAb సమక్షంలో పరీక్షించబడ్డాయి. ఫలితాలు సగటు ఫ్లోరోసెంట్ ఇంటెన్సిటీ (MFI)గా నివేదించబడ్డాయి. అతని-ట్యాగ్ చేయబడిన రీకాంబినెంట్ యాంటిజెన్‌లు మరియు యాంటీ-హిస్ ట్యాగ్ mAbweer మధ్య పరస్పర చర్య అతని-ట్యాగ్ నిరోధించే పెప్టైడ్‌ను ఉపయోగించి పరీక్షించబడింది. హిస్-ట్యాగ్‌బ్లాకింగ్ అస్సే యొక్క ఫలితాలు 1 μg/ml హిస్-ట్యాగ్ బ్లాకింగ్ పెప్టైడ్ అతని-ట్యాగ్ చేయబడిన యాంటిజెన్‌లు మరియు యాంటీ-హిస్మ్యాబ్ యొక్క పరస్పర చర్యను పూర్తిగా నిరోధించగలదని చూపించింది. ప్రతికూల సీరం నమూనాల MFI విలువలు PRRSV-N, PCV2, SIV, ASFV, CSFV మరియు BVDV పాజిటివ్ సెరాతో పోలిస్తే 10-40 రెట్లు తగ్గింపును చూపించాయి. అందువల్ల, యాంటీ-హిస్ mAb ఉపయోగం పూసలకు యాంటిజెన్ బైండింగ్‌ను అంచనా వేయడానికి అనుకూలమైన మార్గాలను అందిస్తుంది.