జర్నల్ ఆఫ్ వెటర్నరీ సైన్స్ & మెడికల్ డయాగ్నోసిస్

శీతాకాలపు విరేచన వ్యాధి యొక్క సెరోలాజికల్ డిటెక్షన్ కోసం రీకాంబినెంట్ న్యూక్లియోకాప్సిడ్ ప్రోటీన్-ఆధారిత ఎంజైమ్-లింక్డ్ ఇమ్యునోసోర్బెంట్ అస్సే అభివృద్ధి

కనోక్వాన్ సింగస, తవీసక్ సాంగ్‌సెర్మ్, ప్రీదా లెర్ట్‌వాట్చరాసరకుల్, సిరిలుక్ జాలా, సకునా ఫట్టనకునానన్ మరియు పిపాట్ అరుణ్విపాస్

వింటర్ డిసెంటరీ డిసీజ్ అనేది తీవ్రమైన మరియు అంటువ్యాధి వైరల్ వ్యాధి, ఇది థాయ్‌లాండ్‌లోని పొలాలలో పాడి పశువులను ప్రతికూలంగా ప్రభావితం చేస్తుంది. రీకాంబినెంట్ న్యూక్లియోకాప్సిడ్ (rN) ప్రోటీన్‌పై ఆధారపడిన పరోక్ష ఎంజైమ్-లింక్డ్ ఇమ్యునోసోర్బెంట్ అస్సే (ELISA) శీతాకాలపు విరేచన వ్యాధికి వ్యతిరేకంగా ప్రతిరోధకాలను గుర్తించడానికి అభివృద్ధి చేయబడింది, ఇది ఎస్చెరిచియా కోలి ప్రోటీన్ వ్యక్తీకరణ వ్యవస్థ ద్వారా ఉత్పత్తి చేయబడింది. ఎపిటోప్ యాంటిజెన్ N ప్రోటీన్ దాదాపు మొత్తం N జన్యు శకలాలు (8-430 aa, N జన్యువు) ఉపయోగించి రూపొందించబడింది. ఇది సుమారుగా 48 kDa rN ప్రోటీన్‌గా గుర్తించబడింది మరియు వెస్ట్రన్ బ్లాట్ విశ్లేషణ ద్వారా బోవిన్ కరోనావైరస్ డైరీ కాటిల్ పాజిటివ్ సీరమ్‌ను బంధించగలదు. ELISA పద్ధతి యొక్క పరిస్థితులు ఆప్టిమైజ్ చేయబడ్డాయి. 5 μg/బావి పూత యాంటిజెన్ సాంద్రతతో rN ప్రోటీన్ ప్రమాణీకరించబడింది. సోకిన మరియు వ్యాధి సోకని పాడి పశువులలో సెరాతో rN ప్రోటీన్ పరీక్షించబడింది. చెకర్‌బోర్డ్ టైట్రేషన్‌ని ఉపయోగించి ప్రాథమిక ప్రతిరోధకాల యొక్క పలుచన 1:50గా గుర్తించబడింది. ఇంట్రా- మరియు ఇంటర్-అస్సేస్ పునరావృతమయ్యేవి. సగటు ± 2SD (ప్రామాణిక విచలనాలు) నుండి సరిదిద్దబడిన OD450 విలువ యొక్క కట్-ఆఫ్ 0.049 వద్ద స్థాపించబడింది. అభివృద్ధి చెందిన rNELISA మరియు SVANOVIR® BCV-Ab ELISA కిట్‌ల మధ్య నిర్దిష్టత, సున్నితత్వం మరియు ఖచ్చితత్వం యొక్క శాతం వరుసగా 96.3, 84.8 మరియు 86.1%. వాణిజ్య పరీక్ష కిట్‌తో పోలిస్తే అభివృద్ధి చెందిన ELISA యొక్క కోహెన్ యొక్క కప్పా విలువ 0.71. ఈ రెండు పరీక్షల నుండి శోషణ విలువల సహసంబంధ గుణకం 0.68. రీకాంబినెంట్ న్యూక్లియోకాప్సిడ్ ప్రోటీన్ ELISA పద్ధతి బోవిన్ కరోనావైరస్ నిర్ధారణ మరియు నిఘా కోసం సహాయపడుతుంది.