జర్నల్ ఆఫ్ ఇమ్యునోలాజికల్ టెక్నిక్స్ & ఇన్ఫెక్షియస్ డిసీజెస్

అత్యంత వ్యాధికారక ఏవియన్ ఇన్ఫ్లుఎంజా వైరస్ సబ్టైప్ H5N1 యొక్క గుర్తింపు కోసం రియల్ టైమ్ ఫ్లోరోసెంట్ క్వాంటిటేటివ్ పాలీమరేస్ చైన్ రియాక్షన్ (PCR) ఏర్పాటు

మియావో-లియన్ టాన్, యువాన్-యువాన్ నియు, వీ షుయ్, జియాన్‌కాంగ్ లిన్, మింగ్ లి మరియు చంగ్రాన్ జాంగ్

ఏవియన్ ఇన్ఫ్లుఎంజా వైరస్ (AIV) యొక్క అత్యంత వ్యాధికారక జాతులు, ఇవి ఇన్ఫ్లుఎంజా A వైరస్లు, దేశీయ పౌల్ట్రీ మరియు మానవులలో తీవ్రమైన వ్యాధిని కలిగిస్తాయి. ఈ అధ్యయనం యొక్క లక్ష్యం అత్యంత వ్యాధికారక ఏవియన్ ఇన్ఫ్లుఎంజా వైరస్ (AIV) సబ్టైప్ H5N1ని గుర్తించడం కోసం ఫ్లోరోసెంట్ క్వాంటిటేటివ్ RT-PCR పరీక్షను ఏర్పాటు చేయడం. చైనాలో కనుగొనబడిన ఏవియన్ ఇన్‌ఫ్లుఎంజా వైరస్ సీక్వెన్స్‌ల ఆధారంగా H5 మరియు N1 సబ్‌టైప్‌స్పెసిఫిక్ ప్రోబ్ సెట్‌లు అభివృద్ధి చేయబడ్డాయి. రెండు జతల ప్రైమర్‌లు మరియు రెండు ఫ్లోరోసెంట్ ప్రోబ్‌లు రియాక్షన్ సిస్టమ్‌లో ఖచ్చితంగా రూపొందించబడ్డాయి మరియు ఆప్టిమైజ్ చేయబడ్డాయి. H5N1 జాతుల నుండి సేకరించిన ప్లాస్మిడ్ RNA మొత్తం ప్రకారం, ఫ్లోరోసెంట్ క్వాంటిటేటివ్ PCR యొక్క ప్రామాణిక కర్వ్ DWQBGWDWQBGW డ్రా చేయబడింది మరియు అన్ని నమూనాలను రియల్-టైమ్ PCR ద్వారా పరీక్షించారు. అత్యంత వ్యాధికారక AIV సబ్టైప్ H5N1 యొక్క పరీక్ష నిర్దిష్టమైనదిగా గుర్తించబడింది మరియు దాని సున్నితత్వ స్థాయి 102~103 కాపీలు/ప్రతిచర్య. ప్రామాణిక వక్రత 109～105 DNA కాపీలు/ప్రతిచర్యలో సాధించబడింది. వైరల్ RNA వెలికితీత నుండి పరీక్ష పూర్తయ్యే వరకు కేవలం మూడు గంటలు పట్టింది. పరీక్ష నిర్వహించడం సులభం మరియు అధిక పునరుత్పత్తి. ముగింపులో, ఇక్కడ వివరించిన ఫ్లోరోసెంట్ క్వాంటిటేటివ్ PCR, H5 మాత్రమే కాకుండా N1 జన్యువులను కూడా గుర్తించడానికి వేగవంతమైన, నిర్దిష్టమైన మరియు సున్నితమైన పద్ధతిని అందిస్తుంది.