బెహ్నామ్ ఖతాబీ మరియు సదానంద్ ఎ ధేక్నీ
జన్యుమార్పిడి జీవి (GMO) సాంకేతికతల ద్వారా అభివృద్ధి చేయబడిన ఉత్పత్తులకు అవాంఛనీయ పరిణామాలు మరియు వ్యతిరేకతను తగ్గించేటప్పుడు జీనోమ్ సవరణ జీవుల యొక్క జన్యు మార్పులో ఎక్కువ ఖచ్చితత్వాన్ని సాధిస్తుంది [1]. ఈ సాంకేతికతలు శక్తివంతమైన మరియు బహుముఖ సాధనాలు మరియు అనేక ఉద్దేశించిన ప్రయోజనాల కోసం జీవులను సవరించే విధానాలను విప్లవాత్మకంగా మార్చాయి. ప్రత్యేకమైన న్యూక్లియస్లను ఉపయోగించి టార్గెటెడ్ జీనోమ్ ఎడిటింగ్ తొలగింపులు, ఇన్సర్షన్లు మరియు సైట్-నిర్దిష్ట జన్యు స్థానాలకు భర్తీ చేయడం ద్వారా అధిక ఖచ్చితత్వంతో పద్ధతులను అందిస్తుంది. ఉదాహరణలలో జింక్ ఫింగర్ న్యూలీసెస్, CRISPR (క్లస్టర్డ్ రెగ్యులర్లీ ఇంటర్స్పేస్డ్ షార్ట్ పాలిండ్రోమిక్ రిపీట్స్), ఒలిగోన్యూక్లియోటైడ్-డైరెక్టెడ్ మ్యూటాజెనిసిస్, RNA-ఆధారిత DNA మిథైలేషన్ మరియు పంట మొక్కల మెరుగుదల కొరకు ఖచ్చితమైన పెంపకం [2,3] ఉన్నాయి. CRISPR/Cas9 మొట్టమొదట 1980ల మధ్యలో, వైరస్లకు వ్యతిరేకంగా వారి రోగనిరోధక వ్యవస్థలో భాగంగా బ్యాక్టీరియాలో కనుగొనబడింది. Cas9 న్యూక్లీస్ ఒకే గైడ్ RNA (sgRNA) సహాయంతో నిర్దిష్ట జన్యు సైట్లను లక్ష్యంగా చేసుకుంటుంది. ప్రతి sgRNA (టార్గెటింగ్ మాలిక్యూల్) 20-న్యూక్లియోటైడ్ స్పేసర్తో వెంటనే ప్రోటో-స్పేసర్ అడ్జసెంట్ మోటిఫ్ (PAMలు) పైకి ఉంటుంది. స్పేసర్ మరియు PAM యొక్క క్రమం తప్పనిసరిగా నిర్దిష్ట జన్యు స్థానానికి అనుబంధంగా ఉండాలి, ఇది జన్యువుల లక్ష్య ఉత్పరివర్తనను అనుమతిస్తుంది.